《表2 不同沉淀剂对去除样品蛋白质的影响》

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《氨基酸分析仪检测婴幼儿奶粉中牛磺酸含量》

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参考相关文献[16]，大部分选择无水乙醇或者磺基水杨酸溶液沉淀蛋白质，本实验选择沉淀蛋白质的2种盐均为中性盐，中性盐对蛋白质的溶解度有显著影响，一般在低盐浓度下随着盐浓度升高，蛋白质的溶解度增加，此称盐溶；当盐浓度继续升高时，蛋白质的溶解度不同程度下降并先后析出，这种现象称盐析，亚铁氰化钾和乙酸锌沉淀蛋白质就是盐析反应，因为蛋白质是胶体，利用乙酸锌与亚铁氰化钾反应生成的氰亚铁酸锌沉淀来挟走或吸附干扰物质，这2种中性盐除蛋白能力强，且浓度高的盐离子有很强的水化力，可夺取蛋白质分子的水化层，使之“失水”，于是蛋白质胶粒凝结并沉淀析出，同时，由于各种蛋白质分子颗粒大小、亲水程度不同，故盐析所需的盐浓度也不一样，本实验通过样品加标实验来考察无水乙醇、磺基水杨酸溶液、乙酸锌和亚铁氰化钾溶液沉淀样品蛋白质的情况，称取10份样品（样品原有量为0.644 mg）精密加入牛磺酸标准线性6（浓度为110.880μg/mL）2.50 mL，平行制备2份，按2.2.3项下制备供试液，上机测定，加标后的样液浓度为13.860μg/mL，通过线性回归方程计算样品中牛磺酸回收率，同时参考文献[17]以及5009.169-2016第二法，考察不同浓度乙酸锌和亚铁氰化钾溶液对牛磺酸回收情况，结果见表2，从结果可见，采用乙酸锌和亚铁氰化钾溶液沉淀样品蛋白质所得到的回收率最高，因为奶粉中蛋白质含量较高，蛋白沉淀剂浓度过低容易沉淀不完全，106 g/L亚铁氰化钾溶液和219 g/L乙酸锌溶液与150 g/L亚铁氰化钾溶液和300 g/L乙酸锌溶液沉淀蛋白所得到的结果差别不大，综合考虑最终选择106 g/L亚铁氰化钾溶液和219 g/L乙酸锌溶液容易沉淀蛋白质效果最佳。