《表1 本文中使用的引物》

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《北极狐β-防御素103基因(CBD103)启动子活性及转录调控元件分析》

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课题组前期扩增获得北极狐CBD103基因序列2 327 bp（包括5′侧翼区2 071 bp、CDS区204 bp、3′侧翼区52 bp），并利用生物信息学的方法对启动子区及调控元件进行了预测[13]。根据预测结果，选取起始密码子上游2 000 bp左右的序列作为候选启动子区并设计引物（表1），PCR扩增4个缺失片段（图1）。。使用Primer Premier 5.0软件分析限制性内切酶位点。PCR扩增体系（50μL）：其中基因组DNA 1μL，10×PCR缓冲液（Mg2+Plus）5μL，dNTP Mixture（2.5 mmol/L）8μL，上游引物（20μmol/L）1μL，下游引物（20μmol/L）1μL，LA Taq DNA聚合酶（5 U/μL）0.5μL，灭菌ddH2O 33.5μL。使用JASPAR、AliBaba 2.1、Nsite、Cluster和Signal SCAN在线网站预测启动子区的转录因子结合位点（表2）。