《表1 构建菌株所用引物》

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《Lager啤酒酵母RLM1基因调控对其抗自溶性能的影响》

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根据酿酒酵母Saccharomyces cerevisiae的RLM1序列设计引物RLM1-F/RLM1-R扩增啤酒酵母RLM1基因，测序后以所测RLM1的序列设计中断引物RLM1-LF/RLM1-LR。各引物如表1所示。以pUG6质粒为模板，RLM1-LF/RLM1-LR为引物用短侧翼序列PCR介导的一步法（SFH-PCR）扩增带有RLM1上下游同源臂的基因KanMX，DNA片段经纯化后进行测序，构建成功后被用于转化啤酒酵母单倍体菌株H5，转化子涂布于新鲜的YPD平板，24 h后影印至含有200μg/mL的G418抗性平板上，28℃培养48 h，挑取阳性转化子进行菌落PCR验证，获得RLM1敲除菌株。