《表5 pMD-18-LAP双酶切体系》

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《重组牛LAP-CATHL2融合抗菌肽的克隆及原核表达》


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加上连接体系后,16℃金属浴过夜,然后将连接产物(标记为pMD-18-LAP)转化到感受态大肠杆菌TOP10中,将转化后的感受态大肠杆菌TOP10用含相对应的抗生素的LB琼脂固态培养基进行筛选,将筛选出的阳性菌落接种于LB液态培养基中,用含氨苄青霉素(100μg·mL-1)的LB液态培养基摇菌培养,约12 h后,离心取菌体,用质粒DNA提取试剂盒提取质粒,提取的质粒用相应的限制性内切酶进行酶切(EcoR I和Sal I进行双酶切。),其酶切体系如表5。双酶切条件为37℃水浴1 h。