《表2 PCR引物:淮北采煤塌陷区水体产超广谱β-内酰胺酶肠杆菌流行特征分析》
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《淮北采煤塌陷区水体产超广谱β-内酰胺酶肠杆菌流行特征分析》
对阳性菌株ESBLs编码基因进行了PCR扩增。按照熊明华等(2016)的方法制备基因组DNA模板。菌株接种LB培养基过夜培养,取1.5 mL培养液离心、洗涤。接着,37℃溶菌酶孵育20 min,加入SDS裂解细胞,酚氯仿异戊醇除蛋白后,加入无水乙醇沉淀DNA。以此DNA为模板进行PCR扩增,PCR反应体系为(25μL)2.5μL 10×PCR Buffer,各1μL 10μmol/L上下游引物(表2)(Dallenne et al.,2010) ,2μL 2.5 mol/L dNTP Mix,0.5μL Taq酶,1μL模板DNA,补齐去离子水至总体积25μL。PCR反应程序为94℃预变性10 min;94℃变性40 s,60℃退火40 s,共30个循环;72℃终止延伸7 min,电泳检测PCR产物。
图表编号 | XD0062457100 严禁用于非法目的 |
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绘制时间 | 2019.06.25 |
作者 | 熊明华、朱继荣、杨芮、张辉、刘远、王光利、李峰 |
绘制单位 | 淮北师范大学生命科学学院、淮北师范大学生命科学学院、淮北师范大学生命科学学院、淮北师范大学生命科学学院、淮北师范大学生命科学学院、淮北师范大学生命科学学院、淮北师范大学生命科学学院 |
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