《表5 ISSR-PCR反应体系的因素水平 (μL)》

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《铁皮石斛及霍山石斛ISSR鉴定体系的建立与优化》


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采用U12(43)均匀设计表,PCR扩增体系的因素水平列于表中(表5)。以UBC834为引物,铁皮石斛的基因组DNA为模板,利用12个反应体系对ISSR-PCR进行优化筛选,反应体系为20μL(表1)。ISSR-PCR扩增程序为:(1)94℃预变性5 min;(2)94℃变性0.5 min;(3)56℃退火0.5 min;(4)72℃延伸0.75 min,共40个循环;(5)72℃继续延伸10 min,4℃保存。