《表2 PCR反应体系(50μL)的组成》

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《高含固率木质纤维素厌氧发酵物总DNA的4种提取方法比较》

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（μL）

提取DNA的细菌16S rRNA基因在PCR扩增仪中完成，引物为357F-GC和517R，由北京六合通经贸公司合成。引物357F-GC的序列为GC clamp-5’-CCTA CCTACGGGAGGCAGCAG-3’，其中GC-clamp序列为5’-CGCCCGCCGCGCGCGGCGGGCGG GGCGGGGGCACGGGGGG-3’，引物517R的序列为5’-ATTACCGCGG CTGCTGG-3’[20]。扩增反应体系为50μL（见表2），DNA marker分子量为2000 bp，模板DNA的浓度为10 ng·μL-1（可根据提取DNA的浓度进行适当倍数稀释）。扩增程序为:95℃预变性10 min，25个热循环（93℃变性1 min，48℃退火1min，72℃延伸1 min 30 s），最后72℃延伸5 min[21]。