《表9 载体无缝衔接反应体系》

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《辣椒生育酚环化酶(TC)基因克隆和生物信息学分析》


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载体无缝连接:据基因序列和pet-30a载体序列信息设计无缝连接引物,反应体系按以下组份配制(表9);PCR反应条件为:95℃5 min;95℃40 s;60℃30 s;72℃4 min,35个循环;72℃10 min,质粒pbi121用Bam HⅠ,SacⅠ酶切,胶回收大片段。PRIMER:Guo2f:5'-gaacacgggggactctagaggatccatggacagcatctatagattgcc-3';Guo2r:5'-TGAACGATCGGGGAAATTCG AGCTCTCAAAGGCCAGGAGGTTTGAGAAAT-3'。