《表2 过表达ilv A菌株摇瓶发酵结果》

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《L-2-氨基丁酸大肠杆菌生产菌株的构建》

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注:a-菌生物量以菌体干重表示。

L-苏氨酸首先在苏氨酸脱水酶催化下生成L-2-酮基丁酸，然后L-2-酮基丁酸再通过转氨基作用生成L-2-氨基丁酸。我们采取逐步延伸L-苏氨酸代谢途径的策略，首先过表达苏氨酸脱水酶（由ilv A基因编码），该酶受到L-异亮氨酸的反馈抑制。前期工作中，我们实验室保存了2个ilv A突变体ilv A2[8]和ilv A4[9]，本研究将这2个突变体在p Trc99a中过表达，导入E.coli THRD中。对菌株THRD/pTrc99a、THRD/pTrc99a-ilv A2和THRD/pTrc99a-ilv A4进行摇瓶发酵，测定菌体生物量、L-苏氨酸和L-2-酮基丁酸积累量，结果如表2。