《表1 PCR引物序列：MicroRNA-9靶向BACE1参与Alzheimer病发生发展的机制研究》

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《MicroRNA-9靶向BACE1参与Alzheimer病发生发展的机制研究》

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RNA/miRNA qRT-PCR使用PrimeScript TM RT reagent kit（TaKaRa，Japan）和SYBR Premix Ex TaqTMII kit（TaKaRa，Japan）试剂盒。逆转录使用步骤参照说明书25μL反应体系:模板2μL+RT引物工作液2μL，再加入无RNA酶水至11μL，接着70℃放置10 min、冰育2 min，最后5×buffer 5μL、Mix1.25μL和无RNA酶水7.75μL。RT反应条件:42℃60 min，70℃10 min。miR-9逆转录使用带有茎环结构的miRNA特异性引物（Ribo，广州），BACE1逆转录引物为Random 6mers和Oligo dT Primer（表1）。PCR反应参照说明书20μL体系:配置PCR反应混合液后放入7900 HT PCR分析仪，进行溶解曲线分析，绘制RNA标准曲线，测量CT值，计算出2-ΔΔCt并进行比较。