《表2 HPLC法在茶多酚组分高通量检测分析中的应用》

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《茶多酚高通量检测技术研究进展》

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注:“—”表示文献中未提及；C（ （-）-catechin，儿茶素） ；EC（ （-）-epicatechin，表儿茶素） ；EGC（ （-）-epigallocatechin，表没食子儿茶素） ；ECG（ （-）-epicatechin gallate，表儿茶素没食子酸酯） ；EGCG（ （-）-epigallocatechingallate，表没食子儿茶素没食子酸酯） ；GC (

选择合适的流动相及洗脱方式，能显著提高茶样中各色谱峰的分离度，增强物质组分的响应值。儿茶素类属多酚羟基结构，水溶液中会发生电离，因而流动相中添加少量的酸可以抑制其解离，防止色谱峰的拖尾，使峰形变得尖锐、对称[36]。康海宁等[37]在流动相中加入少量的三氟乙酸，改善了峰形，减小拖尾，并且在酸性体系下可防止茶叶中儿茶素类的氧化，这个结论与胡燕[38]是一致的。胡燕选用不同浓度的含酸水溶液分别作流动相A，选用乙腈和甲醇分别作流动相B，其他色谱条件均一样，当选用0.1%三氟乙酸水溶液为流动相A、甲醇为流动相B时，分离效果最好、基线平稳，6种儿茶素（EGC、C、EGCG、EC、GCG、ECG）以及茶叶基质中其他成分（咖啡碱、茶氨酸等）均完全分离。茶叶内含化学成分复杂，高通量分析茶叶中各儿茶素含量多采用梯度洗脱。梯度洗脱主要是通过调控流动相的初始比例以及梯度斜率从而影响样品中各组分的保留时间，使各组分分离。刘丽霞[39]通过4种梯度洗脱方式的选择来确定HPLC分析茶叶中各儿茶素类物质的最优方法，结果发现分析相同茶叶样品，不同洗脱程序，所得到HPLC图谱中各色谱峰的峰形、出峰数目、分离度以及总峰面积均不相同。由表2可见，色谱柱多采用C18柱，以250 mm×4.6 mm，5μm的规格居多，流动相中一般加入少量的酸，洗脱程序以梯度洗脱为主，检测器主要是DAD和UVD。