《表2 柱层析比较：高通量筛选技术在双特异性抗体纯化工艺开发中的应用》

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《高通量筛选技术在双特异性抗体纯化工艺开发中的应用》

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将Poros XQ、Capto Q和Capto DEAE3种填料分别装进GE Tricorn层析柱，柱直径0.5 cm，柱高15 cm左右，柱床体积约3 mL。层析系统为GE Pure M150。先用200 mmol/L磷酸氢二钠-磷酸二氢钠（PB）对层析柱进行预平衡，再用20 mmol/L磷酸氢二钠-磷酸二氢钠进行平衡后将蛋白样品上到层析柱，收集流穿液，测试产品质量。同时还比较了3种填料在不同的上样条件pH为6.5和7.5的表现。上样样品的单体纯度为91.4%，残留宿主细胞蛋白量为4 008 mg/L，其他数据见表2。基于表2的数据进行分析，如图5、图6所示，经过阴离子流穿层析，Poros XQ和Capto DEAE均能获得较高纯度的抗体单体，纯度均在95%以上且pH7.5均略好于pH6.5，同时这两种填料对宿主细胞蛋白的去除也有很好的表现，能够将残留的宿主细胞蛋白从4 008 mg/L降低到200 mg/L左右。从回收率看，Poros XQ和Capto DEAE相对较低，尤其是在pH7.5条件下，但仍在下游工艺可接受范围内。Capto Q收率虽高，但纯度指标上的表现均不理想。