《表1 KASP引物序列信息》

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《北京地区荷斯坦母牛群体HH1遗传缺陷基因抽样调研》

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检索Ensembl数据库的牛基因组序列（UMD.3.1），获得A P A F 1基因的部分序列（B T A 5:.63150200-63150600），以此为模板进行PCR引物设计。利用Primer3.0设计引物（如表1所示），针对SNP位点，上游引物APAF1-F1和APAF1-F2的3′端为等位基因突变碱基，将APAF1-F1和APAF1-F2在5’端加上相应的通用接头序列（荧光标签序列）。