《表2 PCR扩增程序:苦玄参转录组EST-SSR引物开发及群体遗传多样性分析》

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《苦玄参转录组EST-SSR引物开发及群体遗传多样性分析》


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SSR采用毛细管电泳荧光检测法进行检测。PCR扩增中SSR荧光引物体系(共20μL):dd H2O 14.8μL,d NTP 0.4μL,Buffer 2μL,正向引物0.3μL(20μmol/L),反向引物0.3μL(20μmol/L),DNA模板2μL,Taq 0.2μL。扩增程序见表2。扩增后SSR采用毛细管电泳方法检测,将甲酰胺与相对分子质量内标按100∶1的体积比混匀后,取9μL加入上样板中,再加入1μL稀释10倍的PCR产物。然后使用3730XL测序仪进行毛细管电泳,利用Genemarker中的Fragment(Plant)片段分析软件对测序仪得到的原始数据进行分析,将各泳道内内标的位置与各样品峰值的位置做比较分析,得到片段大小。