《表1 PCR引物:灯盏乙素对乳腺癌细胞中lncRNAs表达的影响》

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《灯盏乙素对乳腺癌细胞中lncRNAs表达的影响》


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细胞培养5 d后,使用RNAiso试剂盒(Takara),按照说明书对细胞进行总RNA提取.利用Transcriptor First Strand cDNA Synthesis Kit将总RNA(1~2 mg)进行cDNA合成,使用罗氏FastStart Essential DNA Green Master和罗氏LightCycler 96进行荧光定量检测,PCR引物如表1所示.用β-actin作为对照.条件为1、95℃120 s,2、95℃10 s,3、60℃10 s,4、72℃10 s,2~4步骤一共45个循环,使用2-ΔΔCt表示基因相对表达量,2-ΔΔCt的计算方法ΔCt=Ct目的-Ct内参,-ΔΔCt=-(ΔCt处理-ΔCt对照).