《表1 引物序列:二氢杨梅素对绒癌JAR细胞MMP-2、PI3K和Akt表达的影响》

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《二氢杨梅素对绒癌JAR细胞MMP-2、PI3K和Akt表达的影响》


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m RNA、PI3K m RNA、Akt m RNA的表达:取消化后细胞以2.5×105/ml的浓度种植于60mm细胞培养皿中,待细胞融合度达到40%~50%时,给予终浓度为60μg/ml的二氢杨梅素,继续培养36h;同时设立0μg/ml二氢杨梅素为对照组。收集细胞,提取总RNA。按照试剂盒体系进行PCR反应,反应条件为:95℃30sec;95℃5sec,60℃30sec;共45个循环。引物序列见表1。采用2-ΔΔCt相对定量法分析实验结果,ΔΔCt=实验组(Ct目的基因-Ct管家基因)-对照组(Ct目的基因-Ct管家基因),相对表达量=2-ΔΔCt。