《表1 引物序列:大黄游离蒽醌对脂肪干细胞移植治疗大鼠急性胰腺炎的影响》

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《大黄游离蒽醌对脂肪干细胞移植治疗大鼠急性胰腺炎的影响》


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干预治疗3 d之后,从各组分别取5只小鼠胰腺组织置于液氮中准备进行实验,测定胰腺组织中RAGE基因相对表达水平。每个检测重复3次。取出胰腺组织,于冰上充分研磨组织后迅速加入TRIzol试剂裂解细胞抽提总RNA。根据反转录说明书合成相应的c DNA并进行扩增。反应总体系15μL(SYBR Green 3μL、DEPC水10μL、上下引物各0.5μL、200 mg/L cDNA 1μL)。扩增条件均为94℃预变性1 min,94℃变性30 s,59℃退火30 s,72℃延伸30 s,共33个循环。取扩增产物行电泳,电泳结果通过凝胶图像分析系统进行吸光度值分析。RT-PCR两步法试剂盒购自北京赛百盛基因技术有限公司,引物由英潍捷基公司设计合成,引物序列见表1。