《表1 引物序列:GATA4基因H435Y位点突变对小鼠心功能的影响》

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《GATA4基因H435Y位点突变对小鼠心功能的影响》


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PCR反应采用两步法,取适量小鼠心肌组织,用组织RNA提取试剂盒提取总RNA,根据PrimeScript逆转录试剂盒说明书进行总cDNA合成。逆转录反应条件:37℃、15 min,85℃、5 s,4℃保温,在Gene Amp PCR Systerm9700上进行。应用Applied Biosystems7500型荧光定量PCR仪进行PCR反应,扩增条件:95℃、30 s,95℃、5 s,60℃、3 s,共40个循环。采用RT-PCR试剂盒检测Gata4、Sox9、Scleraxis、Tenascin和Aggrecan基因表达水平。所有引物均由合肥海柆生物公司合成,引物序列如表1所示,选用甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)为内参基因。