《表3 β-胡萝卜素梯度洗脱程序》

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《营养组分结合多元统计分析对不同产地秋果枸杞的鉴别》


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枸杞β-胡萝卜素含量的测定参考邓俊林等[16]的研究中的HPLC法,对该方法进行优化后,完成测定。(1)色谱条件。检测器为紫外检测器,色谱柱为Eclipse XDB-C18柱(2.0 mm×75 mm,1.6μm),流速为0.3 mL/min,柱温为35℃,进样量为10μL,检测波长为450nm,流动相为水(A)+丙酮(B),进行梯度洗脱,梯度洗脱程序见表3。(2)样品溶液的制备。准确称取1 g(精确到0.000 1)枸杞粉于50 mL的离心管中,加入15.0 mL丙酮,30℃条件下超声提取30 min,将提取液转移至另一离心管,再加入约10 mL丙酮超声提取10 min(反复提取2~3次,用丙酮洗脱至无色停止洗脱),合并所有提取液,定容至40 mL。在温度为15℃、转数为3 000r/min的条件下离心5 min,吸取上清液经0.22μm的有机系微孔滤膜过滤后,作为枸杞样品的待测液。待测样品按照上述色谱条件下进样,并按照β-胡萝卜素的标准曲线计算出样品中相应的β-胡萝卜素含量。(3)标准曲线的绘制。准确称取1.00mg的β-胡萝卜素标准品,置于10 mL的棕色容量瓶中,用丙酮溶解并定容至刻度线,得浓度为100.0 mg/kg的β-胡萝卜素标准品母液。对该母液分别进行稀释,配置成浓度分别为0.5、1.0、1.5、2.0、2.5 mg/kg的标准品溶液。色谱分析时,β-胡萝卜素标准品溶液需经过0.22μm的有机系微孔滤膜过滤后,再各吸取10μL至棕色进样瓶中,按上述色谱条件对β-胡萝卜素标准溶液进行分析,并根据结果绘制出相应的β-胡萝卜素标准曲线。