《表2 甜菜碱梯度洗脱程序》

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《营养组分结合多元统计分析对不同产地秋果枸杞的鉴别》

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枸杞甜菜碱含量的测定参考张自萍等[15]和艾百拉·热合曼等[4]等的研究中建立的方法，使用高效液相色谱（HPLC）法对参考的方法进行优化，完成测定。（1）样品溶液的制备。精确称取样品粉末2 g（精确到0.000 1），加入50 m L的纯甲醇（料液比为1∶25），在73℃条件下加热回流提取1 h后，冷却过滤，用30 m L的纯甲醇分多次洗涤滤纸残渣和瓶壁残留样液，合并所有洗涤液，在40℃条件下减压浓缩至干。用超纯水将其定容至50 mL的棕色容量瓶中，即为枸杞甜菜碱的待测样液。色谱分析时，先将枸杞甜菜碱的待测样液过0.45μm的有机系微孔滤膜，再吸取2μL样液到棕色进样瓶后，再按本试验中色谱条件对枸杞甜菜碱的待测样液进行检测分析，并按照标准曲线计算出样品中相应的甜菜碱含量。（2）色谱条件。检测器为紫外检测器，色谱柱为NH2柱（2.1 mm×100 mm，2.5μm），流速为0.3 m L/min，柱温为35℃，进样量为2μL，检测波长为195 nm，流动相为水（A）+乙腈（B），进行梯度洗脱，梯度洗脱程序见表2。（3）标准曲线的绘制。准确称取10.00 mg甜菜碱标准品，置于10 mL的棕色容量瓶中，用超纯水定容，得到浓度为1 000.0mg/kg的甜菜碱标准品母液，对该母液分别进行稀释，配置浓度分别为200.0、400.0、600.0、800.0、1 000.0 mg/kg的标准品溶液。色谱分析时，甜菜碱标准品溶液需经0.45μm的有机系微孔滤膜过滤后，再各吸取2μL至棕色进样瓶中，按上文色谱条件对甜菜碱标准溶液进行检测分析，并根据结果绘制出相应的甜菜碱标准曲线。