《表1 改良法与传统法在动物使用量、总成本和培养时间上的比较》

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《新生大鼠原代小胶质细胞分离培养方法的改良》

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近年来，越来越多的研究表明多种中枢神经系统疾病，如阿尔茨海默病、帕金森病、多发性硬化等与小胶质细胞功能障碍有关[11-13]。因此，高效地分离纯化出小胶质细胞供体内外研究其生物学功能，及其与中枢神经系统疾病的病理联系具有重要的意义。传统的分离培养小胶质细胞的方法通常使用T75培养瓶（预先多聚-D-赖氨酸包被）作为最初的混合胶质细胞铺瓶器皿，经过长达10～14 d细胞培养，期间每隔2～3 d更换新鲜的培养基；待小胶质和星形胶质细胞分层后，再经摇床或手摇震荡数小时不等，或采用胰酶消化法分离提纯小胶质细胞[7，14-15]。本研究提出的改良法相比传统法在动物使用量、总成本和培养时间上分别减少了2、3.2、1.5倍（表1）；同时可获得较高产量（>1×106个）、高纯度（≥98%）和高活力（>98%）的小胶质细胞。改良法在最初的脑组织解剖和组织细胞消化解离阶段与传统法基本类似，因此整体实验步骤简单易于操作，可重复性高；可推广至各实验室使用，尤其是科研经费有限的实验室。此外，动物使用量的大幅度降低也符合动物实验的“替代、减少和优化（3R）”原则。