《表1 引物序列:棘孢木霉嗜铁素sidA基因敲除及表型分析》
为排除转化子的异点插入,首先提取转化子DNA,并以其为模板,利用S-F/S-R(检测转化子中是否含目的基因片段)、K1-F/K1-R(检测转化子是否在目的基因5’端发生同源重组)、K2-F/K2-R(检测转化子是否在目的基因3’端发生同源重组)和hph-F/hph-R(检测hph是否整合到目的基因组中)4对验证引物(刘春杰2018)(表1) 分别扩增S、K1、K2和hph片段,然后检测PCR水平上sidA基因敲除情况。只有当嗜铁素基因被敲除(1 597bp),且hph片段在目的位置发生同源置换时,方可初步断定为成功敲除了目的基因(贾晓曼等2018)。
图表编号 | XD0035870300 严禁用于非法目的 |
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绘制时间 | 2019.04.22 |
作者 | 孔爽、赵蕾 |
绘制单位 | 山东师范大学生命科学学院、山东师范大学生命科学学院 |
更多格式 | 高清、无水印(增值服务) |