《表1 常见蛋白A层析介质及其特性》

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《适应高滴度抗体制备的抗体捕集纯化技术研究进展》

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注:表中主要数据来源于各个厂商及参考文献；n.a.表示无。

在单抗药物以及Fc片段融合蛋白的过程中，蛋白A层析技术被作为一项常规的抗体捕集纯化方法而普遍采用。Kelley[30]利用过程模型对单抗药物设备能力的评估也显示，蛋白A层析过程中抗体的最大负荷不仅取决于层析柱长度以及料液在层析柱内的停留时间等因素，也与蛋白A层析介质的饱和吸附容量以及蛋白A配基的化学稳定性等密切相关。因此，自蛋白A层析技术问世以来层析介质的发展一直备受关注。目前，常用的蛋白A层析介质材料包括以GE公司MabSelect SuRe介质为代表的琼脂糖凝胶、以Millipore公司ProSep?-vA Ultra和ProSep?-vA介质为代表的多孔玻璃材料及以Applied Biosystems公司POROS 50 A介质为代表的高分子聚合物材料（如表1所示）。Hahn等[18，31，33]通过对15种市售蛋白A层析介质性能的综合评价发现，以琼脂糖凝胶为材料的蛋白A层析介质具有更高的抗体饱和吸附容量和更低的Kd值；与之相对应的是，多孔玻璃和聚合物分子材料的蛋白A层析介质表现出更高传质速度常数和动态结合容量。通过对基于不同孔径多孔玻璃材料的对比，McCue等[34]进一步发现孔径700?（1?=0.1nm）蛋白A层析介质中抗体吸附容量要显著高于孔径1000?蛋白A层析介质。另一方面，同一抗体分子的饱和吸附容量在层析介质MabSelect X-tra、MabSelect、rProtein A Sepharose FF、Prosep A Ultra High Cap、Prosep A High Cap中呈现出逐步递减的顺序[29]。Zhao等[35]报道了将蛋白A配基偶联于孔道内接枝葡聚糖分子的琼脂糖凝胶中的方法并发现葡聚糖接枝方法的引入明显提升了蛋白A琼脂糖凝胶介质的抗体动态结合容量。蛋白A层析介质性能也受到配基种类和密度、配基固定化方法乃至环境条件等因素的影响[28，36-37]。Von Roman和Berensmeier[28]在考察B结构域多串体对抗体吸附性能影响过程中发现，在配基密度（513～747nmol/mL）相近条件下随着配基中B结构域串联数量由2增至8抗体的饱和吸附容量也由22.9增至80.1mg/mL。Zhang等[38]进一步报道了Z结构域三串体配基密度对抗体结合容量的影响，当配基密度由0.98mg/g增至8.12mg/g介质时抗体结合容量由10.2mg/g升高至64.3mg/g介质。Ghose等[29]报道了商品化MabSelect蛋白A层析介质内分子量更小的抗体Fc片段的结合容量也明显高于分子量更高的抗体或Fc融合蛋白的结合容量，并进一步发现抗体分子的非Fc片段及融合蛋白分子特性的差异带来了不同的空间排阻效应并由此导致结合容量的变化。