《表1 LEH饱和突变体库设计》

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《一种改进的基于PCR的建立饱和突变库的方法》

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带有下划线的密码子和编码氨基酸代表野生型

首先，在4个组合突变位点上下游两侧，设计pET-22b-LEH质粒反扩引物:正向F（5'CCGAGGGCAAGATTACGGGTTGGCGTG 3'）和反向R（5'TTTGCTCGACGGCG-TCGCGGCCGTATG 3'）；然后，设计中间突变片段搭桥引物，4个位点（M78/I80/L114/I116）的氨基酸分别设计3种突变，即存在4种可能（缬氨酸/苯丙氨酸/酪氨酸/野生型，，V-Y-F-W，其中W代表野生型）并如图2和表1所示，并于生物公司合成.