《表2 PCR体系:一种改进的基于PCR的建立饱和突变库的方法》

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《一种改进的基于PCR的建立饱和突变库的方法》


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以待突变的p ET-22b-LEH野生型质粒为模板,以载体骨架的反向扩增引物为正反向引物,按照表2所示体系,进行突变载体的反向扩增.反应流程为98℃预变性3 min,98℃变性20 s,56℃退火20 s,72℃延伸2 min,25个循环,72℃终延伸5 min,最后4℃∞,PCR完成后产物用DpnⅠ处理并回收.