《表1 图1所示红外吸收光谱的各生化分子集团频率指认》

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《癫痫大鼠海马神经元生化分子的同步辐射显微红外光谱成像研究》


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单侧海马注射致癫剂海人藻酸(kainic acid,KA)会导致大鼠注射侧大脑呈现同步化群集高频放电,高兴奋性的神经元细胞内生物化学分子的结构、浓度、定位可能会出现变化。图1(a)为KA注射癫痫大鼠和正常对照大鼠海马切片在可见光显微镜下的形态图。图1(b)显示KA注射癫痫大鼠和正常对照大鼠的大脑海马CA1区神经元的同步辐射显微红外吸收光谱,红外光斑面积大约可以覆盖单个神经元胞体。图1(b)中红外光谱特征吸收峰所属功能基团振动模式指认见表1。在表1中,属于脂质基团的吸收区域集中在红外3 000~2 800和1 750~1 720cm-1区段,对这些区段的显微光谱进行分析能够判断脂类功能集团的浓度[7,11]。分析结果显示癫痫大鼠KA注射侧海马神经元胞体在属于CH2反对称拉伸振动的2 930cm-1的积分吸收面积比正常大鼠海马神经元样增加了约9%。位于1 655cm-1附近的酰胺Ⅰ和位于1 545cm-1附近的酰胺Ⅱ是构成蛋白质的主要成分,其中位于1 655cm-1附近的酰胺Ⅰ对蛋白质的二级结构变化较敏感,主要包含CO的拉伸振动,CN拉伸振动以及NH弯曲振动(图1,表1)[12-13]。为进一步明晰酰胺Ⅰ的光谱结构,我们对1 655cm-1的光谱区段进行了二级导数分析(图2)。相对于正常大鼠海马样品,癫痫大鼠KA注射侧海马神经元胞体的酰胺Ⅰ在1 653cm-1附近多出一个额外的负峰,提示癫痫大鼠大脑高兴奋性放电活动可能会损伤神经元的蛋白质二级结构。位于1 236cm-1附近的的PO2反对称拉伸振动和位于1 086cm-1附近的PO2对称拉伸振动能够反映核酸的浓度。对红外显微光谱的分析显示癫痫大鼠KA注射侧海马神经元胞体在位于1 086cm-1 PO2的吸收积分强度较正常大鼠显著下降。