《表4 FPS基因qRT-PCR反应体系》

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《广藿香法呢基焦磷酸合成酶基因(FPS)的克隆及生物信息学分析》

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在克隆得到的FPS全长CDS区内，使用软件Primer Premier 6设计qRT-PCP的引物，其中上游引物:5'-GGAAGATTGGAACAGACATAG-3'，下游引:5'-CGCACCTTGGAGATTGAT-3'。根据陈英（2015）筛选出的广藿香最适内参基因18S ribosomal RNA片段作为实时荧光定量PCR的内参基因（GenBank:KP694234.1），其中上游引物:5'-CCGACCATAAAC GATGCCGACC-3'，下游引物:5'-TTTCAGCTTTG CAACCATACTCC-3'，引物由上海英潍捷基有限公司合成。采用Mx3005p QPCR Systems仪器进行测定，操作参照SYBR Premix Ex Taq试剂盒（TaKaRa）说明书进行，反应体系如下（表4），反应程序如下:95℃，30 s；95℃，5 s，64℃，34 s，40个循环；95℃，30 s；64℃，30 s；95℃，30 s。