《表2 MYB40不同转录本CRISPR/Cas9靶点引物设计》

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《利用CRISPR/Cas9技术敲除拟南芥转录因子MYB40的两种可变剪接体》

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靶点选择及靶点引物合成:在Tair网站上查找获得MYB40两种转录本的gDNA序列，参考Ma等[8]及Yan等[9]的靶点选择方法，应用Optimized CRISPR Design在线设计软件（http://crispr.mit.edu/）分别对MYB40.1、MYB40.2及MYB40进行靶点选择。因为经BsaⅠ酶切后会留下粘性末端ATTG及AAAC，所以在正向引物的5′端添加接头ATTG，在反向引物的5′端添加接头AAAC。选择MYB40.1的靶点T1.1、T1.2，MYB40.2的靶点T2.1、T2.2及MYB40.1与MYB40.2的共同靶点T（图2），并设计相应靶点引物如下（表2）。