《表2 不同方式提取水稻种子总RNA的检测结果》

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《水稻种子总RNA提取质量问题的探究》

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如图1所示，与水稻幼嫩叶片相比，由于水稻种子富含淀粉等多糖和多酚类物质干扰，裂解液呈粘稠状，无法抑制RNA酶活性，无法提取到有效的总RNA用于后续实验（图1B）。用Gene Mark试剂盒法提取的种子总RNA虽然能看到相对完整的28S和18S条带，然而条带暗淡，浓度偏低，5S条带反而较为明亮（图3A)；OD260/OD280和OD260/OD230均大于2.0（表2），说明提取的总RNA中蛋白质和盐类物质清除干净，而28S和18S条带降解严重，该试剂盒对RNA酶的抑制效果不佳。而经艾德莱试剂盒法提取的种子总RNA中5S条带暗淡，28S和18S条带较明亮、清晰（图3B）；此外，该总RNA的OD260/OD280值在2.0～2.2之间（表2），说明杂质含量较少。经生物分析仪（Agilent 2100Bioanalyzer）进行浓度和RIN完整性检测，总RNA样品中28S峰、18S峰和5S峰均清晰可见（如图4B），与琼脂糖电泳结果基本一致，说明艾德莱试剂盒法提取的种子总RNA具有很好的完整性。因此，3种不同的提取方式中，采用艾德莱试剂盒提取水稻种子的总RNA比另外2种方式效果更好。