《表2 不同方法提取南方红豆杉不同组织总RNA的纯度和浓度》

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《南方红豆杉不同组织总RNA提取方法研究》

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注:“-”表示未提取到RNA。

2.不同方法提取南方红豆杉不同组织总RNA的纯度和浓度分析由表2可知，Trizol法基本未提取到南方红豆杉不同组织的RNA，没有检测到不同组织RNA的OD260、OD280和相应的浓度，不适用于南方红豆杉植物组织的RNA提取。CTAB法提取南方红豆杉幼叶、嫩茎和种子的浓度较高，但是纯度并不太理想，虽然基本无蛋白质和酚类物质的污染，但OD260/OD280大于2.1，表明RNA已经发生降解，与凝胶电泳图结果相吻合。热酚法提取的南方红豆杉不同组织RNA浓度较高，但检测到的OD260/OD280均小于1.8，说明蛋白质和酚类物质等残留严重，但从凝胶电泳图中可知，热酚法可以提取到RNA，但质量较低，因此对热酚法进行了改良。在热酚法的基础上对其进行改良，加入3mol/L醋酸钠（p H5.2）和无水乙醇，使RNA分子发生沉淀，醋酸钠降低了溶液p H值，起到中和的作用，在一定盐离子浓度的环境下沉淀效果更好。因此改良热酚法提取的RNA浓度仍然很高，纯度也得到大幅度提升，不同组织的RNA纯度均值均在1.8~2.1之间。试剂盒法提取的南方红豆杉不同组织RNA的OD260/OD280均在1.8~2.1范围内，纯度高，而浓度相对其他3种方法较低。