《表1 3种方法提取红豆杉愈伤组织和叶片总RNA检测》

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《红豆杉总RNA提取方法的比较》


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总RNA的OD260/OD280比值在1.8~2.2之间,说明不受苯酚和蛋白质的污染,质量好、纯度高(单婷婷等,2018);OD260/OD230比值大于2.0,说明RNA较少受多糖、盐类和有机溶剂的污染(杜希华等,2003)。利用紫外分光光度计分析了本研究利用三种方法提取红豆杉材料总RNA的OD值(表1)。结果显示,试剂盒法和改良CTAB法提取愈伤组织总RNA的OD260/OD280比值分别为2.15、2.11,OD260/OD230比值分别为1.98、2.44,均在高质量RNA标准范围内,表明这两种方法提取的总RNA质量较好,纯度较高,较少蛋白或者其它有机物的污染。尽管Trizol法提取的愈伤组织总RNA OD260/OD280比值在1.8~2.2之间,但是OD260/OD230比值为1.87,略小于2.0,说明Trizol法提取的总RNA含有多糖或其它盐类、有机溶剂等污染。分析南方红豆杉叶片总RNA的质量,发现试剂盒法和改良CTAB法提取总RNA的OD260/OD280比值在1.80~2.10之间,OD260/OD230值分别为0.73、2.21,表明试剂盒法提取的南方红豆杉叶片RNA中存在盐分等污染,而改良CTAB法提取的红豆杉叶片RNA质量更好。