《表2 He La-Cas9＿8单克隆细胞系敲除效率结果》

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《稳定表达Cas9蛋白的HeLa细胞系的建立》

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将He La-Cas9＿8细胞用流式分选系统再次单克隆化，获得9株单克隆细胞，两周后经过扩大培养后按照方法1.4和1.5对其进行Cas9敲除效率和细胞活性检测。结果显示其中第6株细胞的敲除效率最高为87%（表2），表明二次分选后，表达Cas9蛋白单克隆细胞之间敲除效率无明显差异。He La-Cas9＿8-6细胞活性与野生型He La细胞相比差异不显著（图5），表明稳定表达Cas9蛋白对He La细胞的活性无影响，He La-Cas9＿8-6可作为构建敲除文库的候选细胞系。