《表1 不同内切酶的作用位点》

《表1 不同内切酶的作用位点》   提示:宽带有限、当前游客访问压缩模式
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《超声振荡改性玉米醇溶蛋白及高F值寡肽制备》


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选择作用于AAA的蛋白酶、采用内外切酶协同水解是获得高F值寡肽的关键。选用5种在AAA处有酶切位点的内切酶进行初步水解(表1),在打开紧致结构的同时避免产生过多的游离氨基酸[34]。如图5(a)所示,DH从大到小依次为:D、A、E、C、B。游离态氨基酸含量由多到少依次为:D、A、E、C、B(图5(b)),与DH排序一致,D水解物的游离态氨基酸为1.86 mg/m L,其中,BCAA为0.87 mg/m L,AAA为0.37 mg/m L,均高于A水解物(1.03、0.34、0.26 mg/m L),但游离态AAA/BCAA为0.42,低于A水解物(0.76),可能因为木瓜蛋白酶也具备外切酶的作用[35]。结合玉米醇溶蛋白的特性及各内切酶的作用特点,该步选用Alcalase 2.4L碱性蛋白酶进行初步水解。