《表2 变量定义和说明：通过全长cDNA扩增及高通量测序技术获取呼肠孤病毒科病毒的全基因组序列》

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《通过全长cDNA扩增及高通量测序技术获取呼肠孤病毒科病毒的全基因组序列》

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i Sp9:C9磷酰亚胺间隔子

参照Maan等（2007）的方法合成锚定引物（an‐chor primer）与5-15-1引物（表2）。锚定引物序列中加入了C9磷酰亚胺间隔子（C9 phosphoramidite spacer，i Sp9），该结构可使锚定引物维持稳定的发夹结构。锚定引物5'端磷酸基团在T4RNA连接酶的作用下与ds RNA （double stand RNA）链两端的3'端羟基连接，锚定引物3'端在逆转录过程中作为引物，引导与m RNA互补c DNA链的合成。5-15-1引物序列与锚定引物序列互补，用于ds RNA病毒的全基因组PCR扩增。引物均采用高效液相色谱（high performance liquid chromatography，FPLC）方式进行纯化，由上海生工生物工程有限公司合成。