《表2 试验使用的引物和探针列表》

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《用于牛肉掺杂肉成分检测的荧光PCR方法研究》

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注:所有核算序列均为5`-3`方向

（1）荧光PCR反应条件:PCR反应体系为35μL，各成分含量分别为:10×缓冲液3.5μL，2.5 mmol/L 4×d NTPs 1μL；引物^E1.1μL；氯化镁2.9μL；模板11μL；无菌超纯水24μL；Tap DNA聚合酶2.4μL （2.4 U/μL）。（2）荧光PCR扩增条件:循环参数为95℃变性4 min，然后运行35个循环，每个循为94℃变性30 s，55℃变性25 s，75℃变性60 s，35个循环后75℃保温持续300 s，形成扩增产物。（3）荧光PCR质量控制:设定每个样本的荧光PCR检测均为平行样本[14]，扩增Ct值选取2个样的Ct值均值。（4）引物和探针:为了完成对样本中牛肉和猪肉的质量百分比的检测[15]，以牛源性基因、猪源性基因和鸭源性基因为靶基因设定特异性的引物和探针（表2）。