《表3 ISSR引物及扩增的退火温度》

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《基于ISSR的地黄栽培品种与野生群体遗传多样性研究》

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Y为简并碱基（C或T)

PCR反应体系：基因组DNA 1.0μL（约40 ng)，1.0μL引物（10μmol/L)，12.5μL(2×Taq PCR Master Mix），加灭菌双蒸水至25μL，总反应体系为25μL。PCR扩增程序如下：94℃预变性5 min 1个循环；94℃变性45 s，50～54℃退火30 s，72℃延伸1 min；35个循环后，72℃完全延伸5 min；最后4℃保存。PCR产物用2%的琼脂糖凝胶电泳检测，Gold View染色，凝胶成像系统成像，用DL2000 Marker作相对分子质量标记，观察记录结果，分析扩增谱带。PCR扩增引物（表2）及每条引物扩增的退火温度见表3。