《表4 ISSR引物及退火温度(Tm)》

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《新疆野生欧洲李ISSR-PCR反应体系的建立与优化》

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退火温度影响ISSR-PCR反应的扩增结果，过高会导致条带数量减少，亮度较暗，甚至发生无效扩增现象；退火温度过低会引起非特异性扩增，有较多杂带干扰试验（图8）。本试验在已建立野生欧洲李IS-SR-PCR反应体系的基础上，从合成的100条引物中筛选出16条扩增条带清晰且稳定性较高的引物用于后续野生欧洲李遗传多样性的研究，并利用PCR Tm梯度试验确定其最适退火温度（表4）。