《表4 山羽藓ISSR-PCR反应体系筛选出的引物及其最适退火温度Table 4 The optimal annealing temperatures of selected primers for

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《山羽藓ISSR-PCR反应体系优化及引物筛选》


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在建立山羽藓最适ISSR-PCR反应体系的基础上,对已公布的全部100条ISSR引物(UBC801-UB-C900)进行筛选,从中筛选出12条扩增条带丰富且清晰、稳定性和多态性好,可用于山羽藓后续ISSR分析研究的引物,并确定了其最适退火温度(表4)。分别以引物UBC808和UBC835为例(图7),对每条引物各选取两个个体的DNA模板,设置6个退火温度进行试验,两条引物的退火温度低于51℃时,条带亮度较低;高于51℃时条带数目随温度升高明显逐渐减少并模糊。因此,引物UBC808和UBC835的最适退火温度都是51℃。