《表3 筛选出的引物及其最佳退火温度》

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《无花果ISSR-PCR反应体系的建立与优化》


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对于不同的物种,其ISSR-PCR反应最适的IS-SR引物不同。不同引物对应着不同的退火温度,引物的退火温度同样影响扩增条带的数量和清晰度。因此,为得到最佳的扩增效果,不仅需要筛选出无花果ISSR-PCR反应的最适引物,还需要对筛选出的引物最佳退火温度进行逐一筛选。由实验结果可知(图8),退火温度较高时,扩增产物片段数量较少;退火温度低时,扩增产物片段数量较多,非特异性条带增多,背景略有弥散现象。综合考虑,引物UBC873的最佳退火温度为49.0℃。表中为本试验筛选出的16条最佳引物及其最佳退火温度(表3)。