《表1 混合溶剂对酰基化反应的影响》

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《肉豆蔻酰矢车菊素-3-O-葡萄糖苷在混合溶剂体系中的酶法合成》

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在叔戊醇中分别添加20%的吡啶、石油醚、正己烷、异辛烷，研究C3G在混合溶剂中的酰基化反应。由图2a和表1可以看出，添加20%的吡啶、石油醚、正己烷、异辛烷后的酰基化转化率从原来的10.13%分别提高到15.62%、17.22%、18.66%、18.96%，相比于纯叔戊醇溶剂体系均显著提高，并且转化率随着混合溶剂体系log P值的增大而增大。说明疏水性有机溶剂的加入，确实能在一定程度上保护酶的催化活性提高反应的转化率。由酰基化产物的相对含量可以看出，除了20%吡啶-叔戊醇混合溶剂外，酰基化产物的含量并没有随着转化率的提高而提高，说明疏水性溶剂的添加除了对体系中的酶活性产生影响，还能与底物或反应产物相互作用，从而影响酶促反应的进行[27]。20%(V/V）吡啶的加入虽然降低了溶剂体系的log P值，但是转化率相比纯的叔戊醇溶剂仍有显著上升（p<0.05），这表明极性可能不是影响酶活性的唯一因素。每种有机溶剂都有其特定的分子结构，并与酶分子发生独特的干扰或者结合，从而导致生物催化剂的活性不同[19]。反应产生的酰基化衍生物含量在20%吡啶-叔戊醇溶剂体系中也相对较高，可能原因是矢车菊素-3-O-葡萄糖苷和肉豆蔻酸甲酯在吡啶中的溶解度较高[28]。综合考虑反应转化率和产物的相对含量，选择20%吡啶-叔戊醇溶剂进行反应。