《表1 HPV-18LCR分段PCR引物》

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《云南地区宫颈癌组织中人乳头瘤病毒18型LCR基因变异特征分析》

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根据NCBI中HPV-18参考序列（GenBank:AY262282.1）设计2对HPV-18LCR特异性扩增引物（如表1），并使扩增出的2个片段有部分重叠，以拼接获得完整的HPV-18LCR基因序列。PCR体系为50μl，包含5μl HPV-18阳性样本DNA，25μl2×Power Taq PCR Master Mix、0.4μM正向引物和0.4μM反向引物，PCR反应条件为95℃预变性5min，95℃30s，55℃45s，72℃50s，共40个循环，72℃延伸10min。1%琼脂糖凝胶电泳检测扩增结果，并将阳性样品送擎科生物技术有限公司进行DNA双向测序，然后将序列拼接，上传GenBank（序列号:MH238435~MH238438），然后与NCBI中的参考序列进行比对分析。