《表1 凋亡基因引物序列：土贝母皂苷甲逆转A549/DDP细胞系耐药性的分子效应》

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《土贝母皂苷甲逆转A549/DDP细胞系耐药性的分子效应》

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取处于对数生长期的细胞，制成细胞悬液，接入6孔板中，每孔4×105个细胞，37℃，5%CO2培养12 h后，分别加入终浓度为10μg/m L的顺铂、10μg/m L的土贝母皂苷甲、10μg/m L顺铂+10μg/m L土贝母皂苷甲，对照组加入等量生理盐水，继续培养12 h，收集细胞，按照Aid-lab超纯总RNA-pure提取试剂盒提取RNA，并使用Nanodrop2000检测RNA的浓度和纯度，按照Ta Ka Ra反转录试剂盒进行反转录反应，反转录出的c DNA保存于-20℃，然后按照Ta Ka Ra q-PCR试剂盒进行q PCR反应，反应程序：（1） 95℃预变性，30 s；（2） 95℃变性，5 s；（3） 55℃退火，30 s；（4） 65℃延伸，5 s；共40个循环；并根据Cq值计算凋亡相关基因表达量（表1），使用Graph Pad Prism作图。