《表1 引物序列:姜黄素逆转人结肠癌耐奥沙利铂细胞株HCT-116/L-OHP的耐药性》

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《姜黄素逆转人结肠癌耐奥沙利铂细胞株HCT-116/L-OHP的耐药性》


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实验分组同2.4项。用trizol法提取总RNA,用酶标仪检测RNA纯度和浓度。用RNA样品5μg进行反向转录。根据测定的RNA浓度,计算逆转录5μg所需的RNA量。反应体系为20μL,逆转录反应条件为42℃反应60 min,70℃,5 min终止反应,-20℃保存待用。PCR反应体系20μL,PCR反应条件为95℃5 min,95℃30 s,60℃30 s,72℃30 s,40个循环,72℃10 min。采用2-ΔΔCt法进行结果分析求得各mRNA的相对表达量。所用引物由南京谨庭生物科技有限公司合成,见表1。