《表1 磷酸激酶活性检测反应体系》

《表1 磷酸激酶活性检测反应体系》   提示:宽带有限、当前游客访问压缩模式
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《水稻类受体蛋白激酶FTPK1的原核表达及其活性检测》


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(μL)

激酶反应体系为30μL,每个反应需2μg蛋白,30℃反应1 h。本试验用150μL的反应体系,每个反应用10μg蛋白(表1)。设置5个反应体系,所加蛋白种类及用量如表2所示,各反应30℃放置1 h后加入600μL甲醇,混匀后加入150μL氯仿,12 000 r/min离心5min;弃上清后加入450μL甲醇,混匀后12 000r/min离心5 min;弃上清后在真空干燥箱中放置10 min;每管用40μL 1×protein loading buffer回溶,开盖煮沸5 min后冰浴10 min,进行SDS-PAGE电泳。