《表2 常规PCR反应体系》

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《基于PCR及电泳技术，开展高中生物研究性学习》

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注：dNTPs为四种脱氧核糖核苷酸，ddH2O为去离子水。正向引物为LCO1490，反向引物为HCO2198。

PCR扩增建议选用线粒体中的细胞色素C氧化酶亚基I(COI）基因片段。该基因引物比较成熟，扩增成功率高。大多数的动物样品均可以使用通用引物LCO1490和HCO2198进行常规PCR扩增。正向引物序列LCO1490 5’-GGTCAACAAATCATAAAGAT ATTGG-3’，反向引物序列HCO2198 5’-TAAACTTC AGGGTGACCAAAAAATCA-3’。PCR反应体系按照表2的各成分顺序加入PCR管中，需要注意的是最后加入Taq酶（-20°C保存），现加现取，加完后立即放回冰箱。每次加完一种成分需要更换枪头，以免造成样品污染。将所有样品加入PCR管后，用移液枪上下吸打混匀反应液，放入PCR扩增仪中进行扩增。