《表1 T1代靶点编辑情况》

  提示：宽带有限、当前游客访问压缩模式

本系列图表出处文件名：随高清版一同展现

《利用CRISPR/Cas9技术创制高油酸甘蓝型油菜新种质》

1. 获取 高清版本忘记账户？点击这里登录

1. 下载图表忘记账户？点击这里登录

用SP-L1/R引物PCR电泳检测（图1），本试验通过浸染715个外植体，获得了24株抗性苗，其中转基因苗为7株，转化率约为0.98%。对7株转基因植物的4个目的片段分别进行高保真扩增、测序，发现T0代植株中靶位点均未发生编辑。在7个独立株系的84个T1代植株中，检测到部分植株的外源基因已经被自交分离出去，由于上一代没有检测到靶序列发生编辑，我们从仍然保留外源基因的植株中挑选部分植株进行靶序列的编辑情况检测（详见http：//doi.org/10.13430/j.cnki.jpgr.20191211001，附表2、3、4、5、6（附表））。在筛选出的单株中，有1对等位基因均发生编辑的只有Cas9-5-5的BnaFAD2.A05，其他发生编辑的靶序列均为杂合编辑（其中1个等位基因仍为未编辑状态），甚至是1对等位基因均未发生编辑。4个株系的各靶基因的编辑效率高低不一，为12.50%～50.00%（表1）。T1代中Bna FAD2.A05的靶序列总的编辑效率为38.89%，Bna FAD2.C05的为27.78%，BnaFAE1.A08的为22.22%，BnaFAE1.C03的为30.56%。在4个株系中选取基因型比较理想的植株Cas9-1-12-4(Aa Cce1e1E2e2）、Cas9-1-12-5(aacce1e1e2e2）、Cas9-2-7-11(aa Cce1e1E2e2）、Cas9-5-5-3(aa Cce1e1E2e2）和Cas-6-6-1(aa Cc E1e1E2e2），进行套袋留种。