《表1 病毒检测RT PCR引物序列》

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《2016-2018河北地区儿童病毒性脑炎流行特征调查》

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结合过往报道和河北地区的实际情况对临床常见的8种病毒进行检测，引物设计参照GenBank和过往文献[8-10]（表1）。（1)RNA病毒。冰上配置反应体系：4μl RNA模板，2μl Prime script burffer，2μl Prime script RT Enzyme，2μl Oligo dT Primer，4μl Mg2+，ddH2O补足25μl。反应条件：50℃40min；95℃10min；94℃30s，55℃30s，72℃40s，循环40次；72℃5min，收集荧光信号；（2)DNA病毒。DNA病毒反应体系：2.5μl Ex Taq DNA聚合酶，1μl PCR Forward Primer，1μl PCR Reverse Primer，4μl DNA模板，4μl Mg2+，ddH2O补足25μl。反应条件：95℃5min；94℃30s，55℃30s，72℃40s，循环40次；72℃5min，收集荧光信号。