《表1 PCR扩增引物:血液净化中心肺炎克雷伯菌血流感染调查分析》

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《血液净化中心肺炎克雷伯菌血流感染调查分析》


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采用煮沸法制备DNA模板,采用PCR扩增血清荚膜基因,将其分型为K1、K2等型别。PCR反应体系25μl,上下游引物各1μl,模板4μl,反应液12.5μl,蒸馏水补足至25μl。反应条件:预变性95℃5min;95℃45s,58℃90s,72℃90s,35个循环;延伸72℃10min。PCR产物检测,取10μl进行1.5%琼脂糖凝胶电泳,紫外成像仪观察,纯化PCR产物,大连市宝生物工程有限公司测序(表1),在BLAST、GenBank上检索比对。