《表1 MaLAC定量引物序列》
注:退火温度均为60℃,延伸15 s。
三明野生蕉的组培苗由福建农林大学园艺植物生物工程研究所提供,2019年1月,选取在12 h光/12 h暗,(25±2)℃的组培室继代培养40 d,长势相近的四叶组培苗进行处理。将材料置于相对湿度为70%~80%、光强2 000 lx、光周期为12 h光/12 h暗的培养箱中进行0、4、13℃的低温处理,以28℃处理作为对照,24 h后取组培苗叶片。所有样品立即置于液氮中冻存,–80℃超低温冰箱中保存,用于后续RNA提取。使用RNAprep Pure多糖多酚植物总RNA提取试剂盒(TIANGEN)分别提取RNA,采用PrimeScriptTM RT reagent Kit(Perfect Real Time)(TaKaRa)试剂盒反转录RNA获得cDNA用于qRT-PCR。根据荧光定量引物设计原则,设计MaLAC基因定量引物(表1),以MaCAC为内参基因。罗氏Light Cycler480荧光定量qPCR仪器上进行试验,重复3次。采用2‐??CT法计算表达量,采用SPSS的单因素分析法进行差异显著性分析。
图表编号 | XD00178080000 严禁用于非法目的 |
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绘制时间 | 2020.05.25 |
作者 | 刘彦英、倪珊珊、项蕾蕾、陈裕坤、赖钟雄 |
绘制单位 | 福建农林大学园艺植物生物工程研究所、福建农林大学园艺植物生物工程研究所、福建农林大学园艺植物生物工程研究所、福建农林大学园艺植物生物工程研究所、福建农林大学园艺植物生物工程研究所 |
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