《表3 外源添加L-赖氨酸和ATP对pls过表达菌株合成ε-PL的影响》

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《过表达pls基因结合前体流加提高小白链霉菌ε-聚赖氨酸产量》

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由表3可知，外源添加L-赖氨酸均能够提高空载菌和pls过表达菌的摇瓶产量。随着L-赖氨酸浓度的增加（1.0～7.0 g/L），2株菌的ε-PL产量同步增加，并同时在5.0 g/L L-赖氨酸添加浓度时，实现最大ε-PL产量，分别达到（2.41±0.28）g/L和（3.35±0.08）g/L，较未添加分别提高了60.7%和22.2%。CHEN等[22]报道，外源添加2 g/L L-赖氨酸能够提高S.albulus M-Z18摇瓶ε-PL产量5.2%，可知过表达pls能提高L-赖氨酸利用率和ε-PL产率。然而，外源添加ATP对S.albulus M-Z18/p IB139和S.albulus M-Z18/p IB139-pls摇瓶ε-PL产量的作用表现出显著差异。添加ATP（1.0～4.0 mmol/L）能够显著提高S.albulus M-Z18/p IB139的ε-PL产量，但随着ATP浓度增加，ε-PL产量提高幅度呈现下降趋势；添加1.0 mmol/L ATP能够将S.albulus M-Z18/pIB139-pls摇瓶ε-PL产量提高18.2%，当添加量超过1.0 mmol/L后，ε-PL产量却显著下降并且低于对照值，这表明相对高浓度的ATP对ε-PL的合成表现出一定的反馈抑制，我们推测是高浓度的ATP影响了糖酵解和氧化磷酸化进程，进而影响了菌体整体活力。当我们在最适L-赖氨酸添加量（5.0 g/L）基础上，继续考察添加ATP（1.0～4.0 mmol/L）对提高ε-PL产量的作用，发现复合添加L-赖氨酸和ATP对2株菌的ε-PL产量影响如同单独添加ATP，并在5.0 g/L L-赖氨酸+1.0 mmol/L ATP添加策略下，实现S.albulus M-Z18/p IB139-pls摇瓶ε-PL产量达到（3.99±0.72）g/L，较对照提高了45.6%，说明复合添加L-赖氨酸和ATP能够最大化发挥ε-PL合成酶的作用。